师生团队探索恒温扩增技术,尝试30分钟内检测泪液病原微生物

临床核酸检测对温控循环设备的依赖,使得基层眼科现场筛查面临较高的设备门槛。镇江市高等专科学校医药技术学院“眸感”创新实践团队利用课余时间,在专业教师指导下开展课外技术实践活动,尝试将重组酶聚合酶扩增(RPA)技术引入泪液病原微生物检测领域,探索快速检测的可行路径。

这一探索由课堂教学向课外延伸。该校在讲授聚合酶链式反应(PCR)技术时,师生关注到常规核酸检测须配备专用PCR仪、单次反应耗时数小时的现实情况。在指导教师带领下,团队以实验室RPA试剂盒为工具展开摸索。

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(团队成员欧郑白羽在实验室进行引物验证实验)

围绕单纯疱疹病毒、腺病毒等常见眼部病原微生物,团队成员设计了特异性引物与探针序列,并针对RPA反应温度、引物浓度等条件开展多轮参数优化,在模拟泪液样本中反复测试检测效果。为省去传统凝胶电泳的繁琐步骤,团队尝试将扩增产物直接点样于荧光免疫层析试纸,以紫外光源照射判读结果。该方案将检测全流程控制在30分钟以内,对昂贵设备的依赖明显降低。

参与实践的学生对此深有体会。一位团队成员表示:“课本上的参数设置看起来只是几个数字,真正动手才知道,体外诊断要在检测速度和灵敏度之间找到平衡,背后需要大量反复优化。”这段课外实践让学生们对“快速精准检测”有了更为真切的认识。

据悉,该团队后续将继续利用课余时间完善技术方案,在实验室条件下进一步提升检测重复稳定性,逐步扩大病原微生物测试范围,为基层眼科诊疗现场快速筛查积累经验、夯实基础。

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